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接下来的两周,徐辰和刘伟成了实验室里的“黄金搭档”
。
徐辰负责设计实验方案,计算加样量和时间点;刘伟则负责具体的湿实验操作。
刘伟不愧是博五的“资深科研狗”
,操作手法嫻熟无比。
“质粒构建,gibson组装体系,50度反应15分钟。”
刘伟一边念叨著,一边用移液枪精准地吸取微量的dna片段。
他的手很稳,枪头悬停在离液面0.1毫米的地方,轻轻一压,液体便如丝般滑入。
“转化感受態细胞,冰浴30分钟,42度热激90秒,復甦1小时。”
……
然而,实验並不总是一帆风顺的。
第三天,第一批转化结果出来了。
“徐神,情况不对。”
刘伟拿著培养皿,眉头紧锁,“这批菌落长得太慢了。
按照你的设计,我们用的是弱启动子来压低pfk的表达量。
但是现在看来,压得太狠了,菌体好像……快饿死了。”
徐辰接过培养皿,对著光看了看。
確实,上面的菌落细小如针尖,几乎看不见。
“不应该啊。”
徐辰调出模型数据,“根据奇异摄动理论的计算,35%的活性是临界点。
只要高於这个值,糖酵解通量应该能维持基本的生存需求。”
“除非……”
徐辰的目光突然变得锐利,“除非我们忽略了什么。”
他迅速打开电脑,重新检查了一遍那个庞大的微分方程组。
几分钟后,他猛地一拍大腿。
“大意了!
我忽略了『渗漏表达!”
徐辰指著屏幕上的一行参数,有些懊恼地说道:“我用的这个启动子,虽然理论强度是弱的,但在大肠桿菌的实际环境中,它会有一定的基础渗漏。
也就是说,即使我不加诱导剂,它也会偷偷地表达一点点酶。”
“而在我的模型里,我假设它是完美的开关。
这就导致实际的酶活性比我计算的要高,反而触发了细胞的负反馈调节,把整个通路给锁死了。”
徐辰在心里狠狠地吐槽了自己一句:这就是数学家的傲慢啊。
总以为世界是完美的球体,结果现实却是个坑坑洼洼的土豆。
生物系统里的噪音,有时候比信號还大。
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