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第三 染色体检测技术（第1页）

第三节　染色体检测技术

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一、染色体核型分析

染色体核型分析技术是目前常用的染色体病诊断技术。

胎儿染色体核型分析是通过羊膜腔、脐血管和绒毛膜穿刺获取胎儿细胞，经体外培养后收获、制片、显带，进而进行染色体核型分析。

染色体显带技术是染色体标本经过一定处理，并用特定染料染色，使染色体显现明暗或深浅相间的横行带纹。

通过显带技术，使各条染色体都显现出独特的带纹，这就构成了染色体的带型。

每对同源染色体的带型基本相同而且稳定，不同对染色体的带型不同。

根据染色体的化学结构及在细胞分裂的不同时期的特点，衍生出了Q、G、R、等显带技术，建立了相应的染色体核型分析技术类型。

（一）不同的显带技术及相应特点

1.最先建立的是Q显带（Q-banding），借助于喹吖因荧光染料染色体标本进行染色，在荧光显微镜下观察发现，染色体的不同区域显示强弱不等荧光，揭示了人类各条染色体独特的荧光带型。

但Q带存在一定的局限性，其需要在荧光显微镜下进行观察，而且喹吖因荧光染料荧光保存时间短，不能长期保存，需立即观察。

因此，现在几乎不使用。

2.G显带是染色体核型分析中最经典、最常用的检测方法。

G显带由Q显带技术改进而来。

将染色体标本用碱、蛋白酶或其他盐溶液处理，使染色体上的蛋白质变性，再用吉姆萨（Giemsa）染液染色，光学显微镜下即可观察到深浅相间的带纹，易着色的阳性带（PositiveBand）（深带）为富含A—T的染色体节段；不易着色的阴性带（iveBand）为富含G—C的染色体节段。

普通G显带为320~550条带分辨率。

目前，国际统一使用且不断更新了人类细胞遗传学命名并系统描述G显带染色体区、带的标准，与人类基因组变异协会（HGVS）基因变异命名规则进行对接，通过与其比对，即能判定染色体是否发生了畸变。

G显带不仅可以对染色体数目及结构进行全景原位分析，一览染色体核型全貌，而且在平衡易位等结构异常中具有无可比拟的优势，目前尚无法被二代测序、基因芯片技术等技术手段所取代。

G显带可拓展到550~850条带纹，甚至2000条，能提高分辨率发现更微小变异，称为高分辨显带技术（HighResolutionBanding，HRB）。

高分辨染色体由于在带纹中增加了亚带，从而增加了染色体带纹的分辨率。

故对用一般G显带分辨有困难的染色体异常，用高分辨染色体技术判定断裂点就更为确切了。

但由于操作烦琐、成本较高，且随着分子遗传学技术的不断进步，高分辨染色体技术目前的使用并不普遍。

3.显带常用于染色体特殊结构的检测。

C显带在染色体着丝粒区域和其他包含结构异染色质（主要包含有与着丝粒相邻的1q、9q、16q三个区域及Yq区域的末端）的区域深染，而其他区域浅染。

因此，对于1qh+、inv（9）（p12q13）、16qh+、inv（Y）（p11.2q11.2）等特殊结构的异常，C显带可成功检出。

T显带经吖啶橙染色后可将端粒深染，主要用于检测端粒变化。

N显带是通过银染法（Ag-As技术）专门显示核仁形成区（NucleRegion，NOR）的显带技术。

人类近端着丝粒染色体的随体间易发生联合，这种联合可能是造成近端着丝粒染色体不分离、断裂和易位的主要原因。

通过N显带可以清楚地观察到被检测样本是否含有银染近端着丝粒染色体联合，从而准确判断人体细胞是否存在双随体小染色体或者其他的随体异常，如随体柄增加（pstk+）、随体增大（ps+）、双随体（pss）、双随体柄（pstkstk）、Y染色体长臂或者其他染色体末端出现随体（Yqs）等。

（二）产前应用指南